Terapia de Edición Epigénica en gastroenteritis por Rotavirus

La HBV-X  puede modificar la expresión génica mediante mecanismos epigenéticos, o cambios en la expresión génica mediados por procesos distintos a la alteración de la secuencia nucleotídica. Entre estos mecanismos se encuentra la metilación del ADN, mediada por la familia de proteínas de ADN metiltransferasas (DNMT), que catalizan la adición de un grupo metilo en el quinto átomo de carbono de un residuo de citosina para formar 5-metil citosina. La metilación del ADN impacta sobre el nivel de compactación de la cromatina, afecta la interacción entre el ADN y los factores de transcripción y, consecuentemente, influencia la expresión génica.


https://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=12&ved=2ahUKEwigh8667rrjAhWswFkKHayDCtIQFjALegQIBRAC&url=http%3A%2F%2Frepositoriouba.sisbi.uba.ar%2Fgsdl%2Fcollect%2Fposgrauba%2Findex%2Fassoc%2FHWA_1209.dir%2F1209.PDF&usg=AOvVaw2Zea6xqSg-DttThukw7Id3
https://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=3&ved=2ahUKEwigh8667rrjAhWswFkKHayDCtIQFjACegQIABAC&url=http%3A%2F%2Fdspace.umh.es%2Fbitstream%2F11000%2F3809%2F1%2FTD%2520Medina%2520Gali%252C%2520Regla%2520Mar%25C3%25ADa.pdf&usg=AOvVaw0TOyenUQqiHdJ6KaMW3TWw

Técnica de edición genómica para gastroenteritis

La Vibrio parahaemolyticus es una bacteria marina que se ha transformado en un dolor de cabeza para la salud pública y para la industria acuícola por las pérdidas económicas que genera: es una de las principales causas de gastroenteritis por consumo de alimentos marinos contaminados. Ahora, un nuevo estudio ha identificado un gen que nos hace susceptibles a este microorganismo, que una vez ingerido prácticamente arrasa con las células de nuestro intestino y provoca episodios de diarrea intensa. El estudio, publicado en Cell Host & Microbe, se enfocó en editar los más de 20.000 genes humanos en busca de aquellos que nos hacen susceptibles a este Vibrio. Los investigadores utilizaron la técnica de edición genética CRISPR que a través de la proteína Cas9 puede suprimir, reparar o reemplazar genes determinados de forma más fácil y rápida que otras técnicas.

https://www.scientificamerican.com/espanol/noticias/cientificos-ubican-gen-que-nos-hace-susceptibles-a-bacteria-que-causa-gastroenteritis/

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1931312816302657

Terapia con Stem Cells en la Gastroenteritis por Rotavirus

Este estudio representa una experiencia de un solo centro de uso de múltiples dosis diarias de inmunoglobulinas enterales en cuatro pacientes pediátricos con trasplante de células madre hematopoyéticas con infecciones confirmadas por rotavirus. El tiempo para la resolución de los síntomas del rotavirus disminuyó, en comparación con los controles históricos, y se observó una mejoría en la frecuencia y consistencia de las deposiciones en tres de cuatro cursos. Se observó un caso de enfermedad de injerto contra huésped gastrointestinal después de casi dos años de seguimiento. La administración enteral de inmunoglobulinas puede representar una opción clínica válida para pacientes con trasplante de células madre hematopoyéticas con diarrea por rotavirus.

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24658362

Ejemplo de transgénico para gastroenteritis por Rotavirus

 

Las herramientas de edición del gen CRISPR / Cas9 se usaron para eliminar a los genes objetivo de Vero(knock out) que anteriormente se demostró que desempeñan un papel en la producción de polio y rotavirus. Posteriormente, se desarrollaron y adoptaron modelos a pequeña escala de los sistemas de fabricación actuales de la industria para evaluar los aumentos en la producción de polio y rotavirus mediante múltiples líneas celulares estables. A diferencia de los estudios anteriores, las líneas celulares de eliminación directa de Vero no lograron los aumentos de rendimiento objetivo deseados. Estos hallazgos sugieren que se requerirá investigación adicional antes de implementar las líneas celulares Vero modificadas genéticamente en el proceso de fabricación de las vacunas contra el polio y el rotavirus para poder suministrar vacunas.

células Vero:células epiteliales del riñón de un mono verde africano.

https://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=1&cad=rja&uact=8&ved=2ahUKEwi1ot63wrPjAhVOXM0KHVrCB_8QFjAAegQIAxAB&url=https%3A%2F%2Fwww.ncbi.nlm.nih.gov%2Fpubmed%2F29555218&usg=AOvVaw2fZPmdI1jNTcP9XKHkWIMR

 https://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=3&cad=rja&uact=8&ved=2ahUKEwi1ot63wrPjAhVOXM0KHVrCB_8QFjACegQIBRAB&url=https%3A%2F%2Fwww.nature.com%2Farticles%2Fsdata201721&usg=AOvVaw3-Q3bDTUZ4AmoUGscY3wS_

ADN Recombinante en la Naturaleza y ADNR Artificial otavirus

El DAN se recombina de forma natural, en el caso del rotavirus, se da al tener contacto con los enterocitos, es decir durante la infección viral. Dentro de esta nucleocápside se encuentran los once segmentos de ARN de doble cadena que constituyen el genoma del virus. Estos segmentos cerca de 4,500 pb están organizados con una simetría que parece depender del ensamble icosahédrico de VP2, la cual al hacer contacto con los segmentos de ARN, induce en estos a su recombinación. Las proteínas VP1, VP2 y VP3 están involucradas en la organización del genoma dentro de la nucleocápside mediante interacciones ARN-proteína.

Cuando dos cepas diferentes de rotavirus infectan a la misma bacteria, sus ADNs pueden intercambiar segmentos y, como consecuencia, pueden aparecer partículas virales recombinantes con nuevas combinaciones genéticas.

La introducción de mutaciones específicas en el genoma de un virus ha permitido en muchos casos el estudio de las funciones de genes individuales, y de secuencias del genoma viral. 

 Las cepas CDC Barry C Buckland. Nature 2 recombinantes se consiguen mediante la coinfección de cultivos celulares con cepas de rotavirus animales y humanos, produciéndose nuevas cepas con segmentos de RNA de las dos cepas originales. Se seleccionan las cepas cuyo RNA codifica las proteínas virales determinantes del serotipo.

En 1998 la FDA aprobó la vacuna frente al rotavirus (Rotashield®) de los laboratorios Wyeth. Se trataba de una vacuna de virus recombinantes humanos-simios tetravalente, con los serotipos G1-G4. La vacuna fue retirada del mercado por el propio laboratorio un año después del lanzamiento por una posible relación con varios casos de invaginación intestinal. 

https://addi.ehu.es/handle/10810/21457
http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1850-00132016000200011
https://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=24&ved=2ahUKEwimp_7A5KvjAhXHrFkKHbAyACMQFjAXegQIBhAC&url=http%3A%2F%2Fwww.microbiologiaysalud.org%2Fwp-content%2Fuploads%2F2015%2F03%2FVacuna-Rotavirus-FT.pdf&usg=AOvVaw2PwnXCdq5i1feBs7-sZnTP